间接ELISA是实验室**常用的抗体检测方法之一，间接ELISA应用于各种病毒的检测，其原理是通过利用酶标二抗去辨识一抗来测定抗原量。各类ELISA方法均避免了病毒分离试验的危险性，也避免如PCR试验等无菌环境的限约。前期研究中有对口蹄疫病毒的检测和疫苗的研制的相关实验。有人利用原核表达后纯化建立了间接ELISA方法，为O型口蹄疫诊断试剂及基因工程亚单位疫苗的研制奠定了基础。将O型口蹄疫病毒VP1基因在表达载体pET-41b中表达，**终建立了O型口蹄疫病毒的检测方法。
1）血清的采集。采集过程中防止溶血，溶血会导致吸光度升高，影响检测结果。血液应在室温中凝固20～30min，然后2,000～3,000r/min离心，取上清部分，血清量应足够检测所需。2）移液器。使用的移液器要定期校准，确保试剂用量精细，检测数据的精细。3）吸头：配合移液器量程使用。每个标准品与待测样品不能重复使用同一个吸头加样。加入不同样品和不同试剂成分时，应该更换移液器吸头，以避免出现交叉污染。4）洗涤液、稀释液配置以及盛放洗涤液的容器应保持清洁，以防止微生物污染导致非特异性反应。按照说明书，如20倍稀释，即1mL浓缩洗涤液加入19mL蒸馏水。稀释后的洗液可在室温下保存24h。如果出现结晶物，可放置于37℃恒温箱内5～10min。浓缩洗涤液出现浑浊或絮状物请勿使用。
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