黄曲霉***主要存在于发霉的谷类中,比如玉米、小麦、大麦、燕麦、大米等。另外霉变的花生、大豆,也较常出现黄曲霉***。发霉的坚果、棉籽、植物油以及肉制品中也可能含有黄曲霉***。黄曲霉***是由黄曲霉以及寄生曲霉等生成的代谢产物,如果粮食或饲料没有及时地晒干,或储存不当,比如保存在潮湿环境中、开封后未予以密封等,则较容易出现黄曲霉、寄生曲霉,从而产生此类***。黄曲霉***的毒性较强,毒性大于有机农药,属于一类致*物。大量摄入可对肝脏组织造成损害,严重时可能引起肝*,甚至有生命的危险,如摄入大量的黄曲霉***引起急性中毒时,可导致肝细胞脂肪变性等,同时脾及胰腺可有较轻的损害。如果长时间持续摄入,则可能导致慢性中毒,主要表现为肝硬化等。因此如果发现食物存在霉变,则不应再食用,以免对人体造成损害。
黄曲霉素M1检测试剂盒酶联免疫试验步骤
将所需试剂从4℃冷藏环境中取出,置于室温平衡30min以上,洗涤液冷藏时可能会有结晶需恢复到室温以充分溶解,每种液体试剂使用前均须摇匀。取出需要数量的微孔板及框架,将不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1编号:将样本和标准品对应微孔按序编号,每个样本和标准品做2孔平行,并记录标准孔和样本孔所在的位置。
2加样反应:加标准品或样本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶标记物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗体工作液,用盖板膜封板,轻轻振荡5秒混匀,25℃反应30分钟。
3洗涤:小心揭开盖板膜,甩去孔内液体,每孔加350ul工作洗涤液,静置30秒后弃去,重复洗涤5次,***一次拍干(用吸水纸拍干,拍干后未被***的气泡可用干净的***头刺破)。
4显色:每孔加入底物液A50µl,再加底物液B50µl,轻轻振荡5秒混匀,25℃避光显色15分钟(若蓝色过浅,可适当延长反应时间)。
5终止:每孔加入终止液50µl,轻轻振荡混匀,终止反应。
6测吸光值:用酶标仪于450nm处测定每孔吸光度值(建议用双波长450/630nm)。测定应在终止反应后10分钟内完成。
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